پزشکی بالینی

PDF متن کامل تجهیزات

ميكروسكوپ نوري آزمايشگاهي از نور مرئي كه به وسيله‌ي سيستم‌هاي عدسي متمركز شده است تا نمونه‌هاي تحت بررسي را بزرگ‌نمائي كند، استفاده مي‌كند. اين دستگاه يكي از اجزاي پايه‌ي يك آزمايشگاه باليني است و تقريبا در هر بخش از آزمايشگاه، از شيمي (براي ادرارسنجي) تا هماتولوژي، سيتولوژي، هيستولوژي و ميكروبيولوژي  استفاده مي‌شود.

در هـمـــاتـــولـــوژي، آنــالـيــز مـيـكــروسـكــوپــي سـلــول‌هــاي خــونــي بـراي تشخيـص لـوسمـي، آنمي، و ديگر اختلالات خوني و نيز عفونت‌ها و آلـرژي‌هـا اسـتـفاده مي‌شود. در سيتولوژي و هــيــســتــــولــــوژي، مــــي‌تــــوان بـــا بـــررســـي‌هـــاي ميكروسكوپي، بر اساس تغييرات غيرطبيعي در سلول‌ها يا بافت‌ها، شرايط خوش خيم، بدخيم، التهـاب و پيـش سرطاني را از هم تفكيك كرد. بــررســي مـيكـروسكـوپـي urinary sediment، در تعيين عملكرد كليه اهميت خيلي زيادي دارد و تـركـيـب بـررسـي‌هـاي مـاكـروسـكـوپي (ارزيابي شيميائي) و ميكروسكوپي، ادرارسنجي كامل را فراهم مي‌كند. تكنيك‌هاي انتخابي رنگ آميزي نيز مي‌توانند براي كمك به شناسائي قارچ‌ها، parasites و بـــاكــتــري‌هــا، در مـيـكــروسـكــوپــي استفاده شوند.

ميكروسكوپ‌هاي نوري از نور مرئي و يك سـيـسـتــم عــدســي بــراي بــزرگـنـمـائــي تـصـاويـر نــمــــونــــه‌هــــاي كــــوچـــك اسـتـفـــاده مـــي‌كـنـنـــد. مـيـكــروسـكــوپ‌هــاي اپـتـيـكــال قــديـمــي تــريـن طراحي ميكروسكوپ‌ها هستند و احتمالا در قرن 17به شكل فعلي شان طراحي شده‌اند. نوع پــايــه‌ي آن‌هــا مـي‌تـوانـد بسيـار سـاده بـاشـد؛ امـا طـراحـي‌هـاي بـسيار پيچيده هم با هدف بهبود رزولـوشـن و تمايز نمونه‌ها ارائه شده اند. اين ميكروسكوپ‌ها مرسوم اند زيرا نور مرئي در آن‌ها استفاده شده است و لذا مي‌توان نمونه‌ها را مستقيم با چشم مشاهده كرد. 
تصوير يك ميكروسكوپ نوري را  مي‌توان با دوربين‌هاي معمولي حساس به نور اخذ كرده و يك ميكروگرام به دست آورد. در اصل، تصاوير با فيلم عكاسي به دست مي آمدند اما توسعه‌هاي مدرن در دوربين‌هاي CCD و CMOS امكان اخذ تصاوير ديجيتال را فراهم كرده اند. ميكروسكوپ‌هاي منحصرا ديجيتال نيز امروزه موجود هستند كه از دوربين CCD براي بررسي يك نمونه استفاده مي‌كنند و تصوير حاصل را مستقيما روي صفحه‌ي كامپيوتر نشان مي‌دهند بدون اين كه نياز به قطعه‌ي چشمي باشد.
ميكروسكوپ آزمايشگاهي نوري با زمينه روشن (Brightfield) نمونه را به صورت محوري با نور سفيد

روشن مي‌كند؛ به نحوي كه شي روي يك پس زمينه‌ي روشن ديده شـود (شكـل 4.) بسيـاي از نمـونـه‌هـاي ميكروسكوپي، رنگ آميزي شده و به صورت بخش‌هاي باريك بريده مي‌شوند؛ به صورتي كه جزئيات سطحي و ساختار آن‌ها را بتوان با استفاده از ميكروسكوپ‌هاي با زمينه روشن تشخيص داد. اين ميكروسكوپ‌ها، با اجزا و متعلقات مناسب، مي‌توانند براي ميكروسكوپي phase-contrast، فلورسنس، و/يا زمينه تاريك (darkfield) پيكربندي شوند. 
ميكـروسكوپ‌هاي آزمايشگاهي نوري با زمينه تاريك، نمونه را از زواياي مورب روشن مي‌كنند به نحوي كه روي يك پس زمينه‌ي تاريك، نمونه روشن به نظر مي‌رسد (شكل 5.) اين ميكروسكوپ‌ها در ميكروبيولوژي و سيتولوژي استفاده مي‌شوند.
ميكروسكوپي فلورسانس از تشعشعات موج كوتاه (به عنوان مثال نور ماوراءبنفش) استفاده مي‌كند تا نمونه هائي كه به صورت طبيعي فلئورسانت هستند يا نمونه‌هايي كه با رنگ‌هاي فلئورسانت رنگ آميزي شده اند (فلئوروكرومها) را برانگيخته كنند. زماني كه اين نمونه‌ها با نوري با طول موج صحيح برانگيخته شوند، روشن خواهند شد و در طيف مرئي، قابل تشخيص هستند. فيلترهاي خاصي براي محدود كردن طول موج‌هاي نور تـابيـده شده به نمونه و مقدار نور تحريك كه توسط نمونه جذب نمي شود استفاده مي‌شوند.
مـيـكــروسكـوپ‌هـاي آزمـايشگـاهـي نـوري تـداخلـي (Interference)، بـراي تقـويـت تفاوت‌ها در تصوير،

تفاوت‌هاي مسير نوري در شي را معكوس مي‌كنند. اين كار را مي‌توان با تداخل بين نوري كه از شي مي‌گذرد و نوري كه از يك مسير بدون مانع مــي‌گــذرد، انـجــام داد. مــرسـوم‌تـريـن روش DIC يـا differential interference contrast است كه نور منبع را قطبي كرده و به دو پرتو تجزيه مي‌كند. اين پرتوها در جهات كمي متفاوت حركت مي‌كنند و از شي مي‌گذرند و سپس دوباره با هم تركيب مي‌شوند. سپس اختلاف‌هاي مسير نوري به صورت تفاوت در شدت و رنگ (رنگ آميزي رنگي نوري) ديده مي‌شوند. اين ميكروسكوپ‌ها امكان ديدن نمونه‌هاي زنده يا برش‌هاي باريك رنگ آميزي نشده، را با تمايز بالا فراهم مي‌كنند.اپتيك، در ميكروسكوپ‌هاي phase-contrast، فاز نور منكسر شده توسط نمونه را به اندازه‌ي يك چهارم طول موج، در مقايسه با نور مستقيم منحرف نشده كه از داخل نمونه يا اطراف آن مي‌گذرد، تغيير مي‌دهد. با اين كار، امكان مشاهده‌ي جزئيات بدون ثابت كردن و رنگ كردن نمونه فراهم مي‌شود.
نور قطبي شده، كنتراست را بهبود مي‌دهد و جزئياتي  را كه در شرايط ديگر ديدن آن‌ها مشكـل اسـت  قـابـل روئـت مي‌كند. ميكروسكوپ‌هاي با نور قطبي شده، مي‌توانند اطلاعاتي در مورد شرايط و ساختار نمونه فراهم كنند.
ميكروسكوپ‌هاي استريو (Streo)، دو هدف براي مشاهده و دو چشمي دارند و لذا يك ديد سه بعدي از

پيكربندي نوري

دو نوع پيكربندي پايه در ميكروسكوپ‌هاي اپتيكال مرسوم وجود دارد: ساده (تك عدسي) و تركيبي (تعداد زيادي عدسي.) عمده‌ي ميكروسكوپ‌هاي تحقيقاتي مدرن از نــوع تــركـيـبــي هـسـتـنــد در حـالـي كـه بـرخـي از انـواع ميكـروسكـوپ‌هـاي ارزانتـر، مـيـكـروسـكـوپ‌هـاي سـاده‌ي تـك عدسي هستند. اساسا يك شيشه‌ي بزرگنما، يك ميكروسكوپ پايه‌ي تك عدسي است. در حالت كلي اپتيك ميكروسكوپ، استاتيك است؛ براي كانوني كردن در عمق هاي متفاوت، بايد فاصله‌ي نمونه و عدسي تنظيم شود و براي به دست آوردن يك زمينه ديد وسيع‌تر يا محدودتر، بايد از عدسي شي اي با بـزرگـنـمـائـي مـتـفـاوت استفاده شود. اغلب ميكروسكوپ‌هاي تحقيقاتي مدرن، يك مجموعه‌ي جداگانه براي روشن كردن تصوير دارند. 

ميكروسكوپ تك عدسي (ساده)يك ميكروسكوپ ساده  تنها از يك عدسي براي بزرگنمائي استفاده مي‌كند، اين طــراحــي پــايــه‌يمـيكـروسكـوپ نـوري اسـت. مـيـكــروسـكــوپ‌هـاي Van Leeuwenhoek يـك عدسي ساده و كوچك همگراكننده دارند كه با مكـانيـزم پيـچ بـراي نگـه داشتـن نمـونـه‌ي مورد بررسي، روي يك صفحه‌ي برنجي قرار گرفته است. 

ميكروسكوپ‌هاي تركيبييـك ميكـروسكـوپ تـركيبـي از چنـد عدسي براي جمع كردن نور از نمونه و يك مجموعه‌ي ديگر از عدسي‌ها براي متمركز كردن نور روي چـــشــــــم يــــــا دوربـــيــــــن اســـتـــفــــــاده مـــــي‌كــنـــــد. ميكروسكوپ‌هاي تركيبي سنگين‌تر، بزرگ‌تر و گران‌تر از ميكروسكوپ‌هاي ساده اند؛ چرا كه تعداد عدسي‌هاي مورد استفاده در ساختن آن‌ها بـيـشـتر است. مزيت اصلي چند عدسي، بهبود NA، كاهش خطاهاي كروماتيك و عدسي‌هاي شـي اي قـابـل تـعـويـض براي تنظيم بزرگنمائي اسـت. هـمـچـنـيـن يـك مـيـكـروسـكـوپ تـركيبي چيدمان‌هاي پيشرفته تري، مانند كنتراست فاز، براي روشنائي دارد.

دريـچــه‌ي ديــد شــي بــر حـســب زاويــه (زاويه‌ي بين واگراترين پرتوهايي كه مي‌توانند از شي براي تشكيل تصوير عبور كنند)  است.
مـحــدوديــت‌هـايـي روي بـازه‌ي بـزرگنمـائـي مفيد هر objective اي وجود دارد: حد بالاي objective برابر با 1000NA* و حد پائين آن برابر با 250NA*   است . objective با NA برابر با 25/0‌ مي‌تواند 25000 خط را در هر اينچ تفكيك كند؛ بنابراين اگر شي تحت مشاهده، از مرتبه‌ي 35000 خط در هر اينچ باشد، نمي‌توان از اين objective استفاده كرد.
بـزرگنمـائـي مفيـد همچنين تحت تاثير طول لوله‌ي نوري (كه معمولا قابل تنظيم نيست)، طول لوله‌ي مكانيكي (كه مي‌تواند براي تصحيح بزرگنمائي كمي تغيير داده شود)، و عمق كانوني (فاصله‌ي بين حد بالا و پائين تيزي در تصوير تشكيل شده توسط سيستم) قرار دارد.
اجزا
تمـام ميكـروسكـوپ‌هـاي اپتيكـال مـدرن طـراحـي شده براي ديدن نمونه‌ها با نور انتقالي، اجزاي پايه‌ي يكساني در مسير نور دارند كه به ترتيبي كه نور از آن‌ها عبور مي‌كند عبارتند از (شكل 7:) 
1- عدسي‌هاي چشمي (قطعه‌ي چشمي( )شماره 1)
2- برجك شي اي يا nosepiece چرخنده (براي نگهداشتن چند عدسي شي اي( )شماره 2)
3objective  -(شماره 3)
4- چرخ تمركز براي حركت دادن stage ( شماره 4 براي تنظيم غيردقيق و شماره 5 براي تنظيم دقيق)
5- قاب (شماره 6)
6- منبع نور، نور يا آينه (شماره 7)
7- ديافراگم و عدسي كندانسور (شماره 8)
8Stage  -(براي نگهداشتن نمونه( )شماره 9)
اجـزاي پـايه‌ي يك ميكروسكوپ نوري  شامل سيستم عدسي (قطعه‌ي چشمي، objectiveها و كندانسور substage)، بدنه (لوله‌هاي مشاهده با تنظيم ديوپتر، interpupillary adjustment, and revolving nosepiece، )stage و كنترل‌هاي آن، و سيستم روشنايي (ديافراگم iris و پورت نور) در شكل 8 هم نشان داده شده اند.


قطعه‌ي چشمي 
قطعه‌ي چشمي يك استوانه شامل دو يا چند عـدسـي اسـت كـه وظيفـه‌ي آن، كـانـونـي كردن تصـويـر

بـراي چشـم اسـت. قطعه‌ي چشمي به انتهـاي بـالايـي لـولـه‌ي بـدنـه وارد مي‌شود. اين جــزء، قــابــل تـعــويــض اســت و انــواع مـختلـف قـطـعــه‌هــاي چـشـمــي بــا درجــات بــزرگـنـمـائـي مـتـفـاوت قـابـل استفـاده هستنـد. مقـاديـرمعمـول بـراي بـزرگـنـمـائـي قـطـعـات چـشمي عبارتند از دوبـــرابـــر، 10 بـــرابـــر و 50 بــرابــر. در بــرخــي از مـيـكـروسـكـوپ‌هـاي با كارائي بالا، پيكربندي اپـتـيـكـال عـدسـي شي اي و قطعه‌ي چشمي به نـحوي تطبيق داده مي‌شوند كه بهترين كارائي اپتيكال ممكن به دست آيد. 
قـطـعـه‌ي چـشـمـي عـمـدتـا بـراي بـزرگـنـمائي تـصــويــر نـمــونـه كـه در پـشـت objective تـولـيـد مي‌شود استفاده مي‌گردد. بزرگنمائي كلي، برابر بـا بـزرگنمـائـي objective ضـرب در بزرگنمائي چـشـمــي اســت. قطعـه‌ي چشمـي در طـراحـي، مثبت يا منفي است. در طراحي مثبت، ديافراگم چشمي (ocular)، داخل سيستم عدسي در نظر گرفته نمي شود بلكه objective، تصوير را داخل ديـافـراگم چشمي (قرار گرفته زير عدسي‌هاي زمينه) و صفحه‌ي كانوني چشمي نشان مي‌دهد. در طـراحـي مـنـفـي، سـيـسـتـم عـدسـي، ديافراگم چـشـمـي را  دربـرمـي‌گـيـرد. عـدسـي‌هـاي زمينه باعث مي‌شوند پرتوهاي objective، همگرا شده و در ديافراگم چشمي متمركز شوند. 
چهار نوع پايه، قطعه‌ي چشمي وجود دارند:  (huygenianطراحي منفي)،  Ramsden (طراحي مـثـبت)، جبران‌كننده (توان كمتر از 15 برابر، با طــراحــي مـنـفــي و تــوان بـيـشـتـر از آن، طـراحـي مثبت‌اند) و زمينه-گسترده (طراحي مثبت.)
 ‌قـطـعـــات چـشـمـــي Huygenian مـعـمــولا بــا objectiveهـاي بـي رنگ يا  semiapochromatic با بزرگنمائي 20 برابر يا كمتر استفاده مي‌شوند. مدل‌هاي بهبود داده شده از چشمي‌هاي Ramsden را مي‌توان با objective اي‌هـاي بـي رنـگ بـا بـزرگنمـائـي 17 بـرابـر يـا كمتـر و NA بـرابـر بـا 65/0‌ استفـاده نمـود. چشمي‌هاي جبران‌كننده براي استفاده با شي اي‌هاي apochromatic طراحي شده‌اند اما هـمـچـنـين مي‌توان از آن‌ها براي semiapochromates استفاده كرد. بازه‌ي بزرگنمائي قطعه‌ي چشمي، از 5 برابر تا 30 برابر است و مقدار معمول آن ده برابر است. معمولا پاتولوژيست‌ها از قطعه‌هاي چشمي با ميدان ديد وسيع استفاده مي‌كنند، به اين دليل كه زمينه ديد مسطح و بزرگي براي بررسي نمونه‌هاي بزرگ از بافت دارند.
برجك شي اي يا nosepiece گردنده
اين قسمت مجموعه‌ي عدسي‌هاي شي اي را نگه مي‌دارد و به كاربر امكان سوئيچ كردن بين objectiveهاي مختلف را مي‌دهد.
Objective
در انتهاي پاييني يك ميكروسكوپ تركيبي يك يا چند عدسي شي اي وجود دارد كه نور را از نمونه جمع مي‌كند. objective معمولا استوانه اي است كه يك عدسي تركيبي چندجزئي يا تك شيشه اي را دربرمي گيرد. معمولا سه عدسي شي اي به يك nosepiece دايره اي پيچ شده اند و مي‌توان آنها را چرخانده و يكي را انتخاب نمود. اين پيكربندي به صورت parfocal طراحي شده است؛ يعني زماني كه از يك عدسي به عدسي ديگر سوئيچ مـي‌شـود، نمونه همچنان در كانون باقي مي‌ماند. Objectiveهاي ميكروسكوپ با دو پارامتر بزرگنمائي و NA مشخص مي‌شود. بزرگنمائي معمولا از  5 برابر تا 100 برابر و NA از 14/0‌ تـا 7/0‌ اسـت كـه بـه ترتيب متناظر يا طول‌هاي كانوني 2 تا 40 ميلي متر است. عدسي‌هاي شي اي با بزرگنمائي‌هاي بيشتر، NA بالاتر و عمق زمينه كمتري در تصوير حاصل دارند. 
سه نوع پايه‌ي objective عبارتند از بي رنگ، فلوريت و apochromatic. نوع بي رنگ، بدون اين كه نور را به رنگ‌هاي تشكيل دهنده‌ي آن تجزيه كنند آن را منكسر مي‌كند. نوع فـلــوريــت درجــه‌ي تـصـحـيــح بــالاتــري نـسـبـت بـه بـي رنـگ‌هـا فـراهـم مـي‌كـنـنـد. نـوع apochromatic براي سه طول موج مختلف نور و نيز براي انحرافات كروي تصحيح مي‌شوند.
بـرخـي از objectiveهـا، بـراي استفـاده بـا شيشـه‌ي پـوشـش و برخي براي استفاده با نمـونـه‌هـاي پـوشيده نشده تصحيح مي‌شوند. نوع اول نياز به نوع خاصي از شيشه‌ي پوشش (با ضخامت 17/0‌ تا 19/0‌ ميليمتر) دارند؛ تمام objectiveهاي با توان متوسط تا بالا براي اين بازه از ضخامت تصحيح مي‌شوند. اين تصحيح همراه با NA، بزرگنمائي و طول لوله روي objective نوشته مي‌شوند (شكل 9.)

objective غوطه ور در روغن

برخي از ميكروسكوپ‌ها از objectiveهاي غوطه‌ور در آب يا روغن براي رسيدن به رزولوشن بالاتر در

بزرگنمايي‌هاي بالا استفاده مي‌كنند (شكل 10NA .) به بزرگي 6/1‌ مي‌تواند به دست آيد. هر چه اين پارامتر بزرگ‌تر باشد نور بيشتري جمع شده و امكان مشـاهـده‌ي دقيـق جـزئيـات كـوچكتر فراهم مي‌شود. يك عدسي غوطه ور در روغن معمولا بزرگنمائي 40 تا 100 دارد.
يك قطره روغن روي شيشه‌ي پوشش يا نمونه قرار داده مي‌شود. بعد از متمركز كردن نمونه در زير objective با توان كم، عدسي غوطه ور در روغن به محل جابجا شده و با روغن تماس پيدا مي‌كند و مي‌تواند شيشه‌ي پوشش را لمس كند. در برخي از طراحي‌ها بـراي اجتنـاب از خـراشيـده شده عدسي غوطه ور در روغن، عدسي با فنر بارگذاري مـي‌شـود. استفـاده از شيشـه‌ي پـوشـش بـا ضخـامـت اشتباه يا نمونه‌هاي بدون پوشش مـــي‌تـــوانـــد مـنـجـــر بــه خـطــا در objectiveهــاي غـوطـه‌‌ور در روغـن شـود. ايـن objectiveهـا به خاطر رزولوشن بالائي كه دارند بايد فقط براي محيط‌هاي با بزرگنمائي زياد استفاده شوند. NA يك هدف غوطه ور در آب تنها زماني معتبر است كه در تماس روغني با اسلايد باشد.  

كندانسور
كندانسور عدسي طراحي شده براي متمركز كردن نور منبع روشنائي روي نمونه است و البته

مـي‌تـوانـد شـامل مشخصه‌هاي ديگر مانند يك ديافراگم و/يا فيلترها براي تنظيم كيفيت و شدت روشنائي باشد.
كــنــــدانــســــور substage نــــور مـنـبـــع را روي صفحه‌ي نمونه، متمركز مي‌كند و ميزان كافي نــور هـمـگــراشـده، بـراي مـيـكـروسـكـوپ بـراي رسيـدن بـه رزولوشن كامل فراهم مي‌كند. سه نـــوع پـــايـــه‌ي كـنـــدانـســـور عـبـــارتـنـــد از Abbe، اكــــــــرومــــــــاتــــيـــــــك و  aplanatic (شــــكـــــــل 11.) ميكـروسكـوپهـاي روتيـن آزمـايشگـاهـي عموما مجهـز بـه كندانسور Abbe هستند كه هيچ نوع انحرافي را تصحيح نمي كند. يك سيستم عدسي كه براي انحرافات كروي، تصحيح نشده باشد، نـقـطــه‌ي كــانــونــي مـشـتـركـي فـراهـم نمـي كنـد. كندانسورهاي آكروماتيك، خطاهاي رنگي را كه در اثر انكسار نور سفيد به پرتوهاي قرمز و بنفـش ايجاد مي‌شوند، تصحيح مي‌كنند و انحرافات كروي را هم تا حدي تصحيح مي‌كنند. كندانسورهاي aplanatic انحرافات كروي را به صورت كامل تصحيح مي‌كنند اما هيچ خطاي رنگي اي را تصحيح نمي كنند.
لوله‌هاي مشاهده‌ي ميكروسكوپ، يك تنظيم ديوپتر دارند كه عدسي‌ها را به بينائي اپراتور تطبيق مي‌دهد و همچنين يك تنظيم بين دو عدسي (interpupillary)دارند كه قطعه‌ي چشمي را براي تطبيق با فاصله‌ي بين چشمان اپراتور اصلاح مي‌كند. Stage كه اسلايد نمونه روي آن قرار مي‌گيرد، در مركز ميكروسكوپ است و مي‌تواند در جهات X و Y و Z حركت داده شود. بسياري از stageها ورنيه هائي دارند كه به تعيين مكان‌هاي خاصي روي اسلايد كمك مي‌كند. بدنه‌ي ميكروسكوپ نيز يك قطعه (nosepiece) دارد كــه objective روي آن ســوار مــي‌شــونــد و مـعـمــولا چـهــار يــا پـنـج objective را نگه‌مي‌دارند. 

خوبي كار كند بايد كل مسير نوري با صحت بالائي تنظيم و كنترل شود. با اين وجود اصول عملكردي پايه‌ي ميكروسكوپ بسيار ساده اند (شكل 12:)
عدسي شي اي در ساده ترين حالت يك شيشه‌ي با بزرگنمائي بالا يعني يك عدسي با فاصله‌ي كانوني بسيار كوتاه است. اين عدسي بسيار نزديك به نمونه‌ي در حال بررسي قرار مي‌گيرد و به اين ترتيب تصوير بزرگنمائي شده اي از شي تشكيل مي‌شود. اين تصوير معكوس شده و ميتوان آن را با برداشتن قطعه‌ي چشمي و قرار دادن يك كاغذ tracing روي انتهاي لوله آن راديد. با كانوني كردن دقيق يك نمونه‌ي روشن مي‌توان يك تصوير بسيار بزرگ را ديد. 
در اغلب ميكروسكوپ‌ها قطعه‌ي چشمي يك عدسي مركب است يعني يك عدسي نزديك به جلو و يكي نزديك به انتهاي لوله‌ي قطعه‌ي چشمي قرار دارد. در بسياري از طراحي‌ها يك تصوير مجازي بين دو عدسي قطعه‌ي چشمي، كانوني مي‌شود به اين صورت كه عدسي اول، تصويرواقعي را كانوني مي‌كند و عدسي دوم، چشم را قادر مي‌سازد كه روي تصوير مجازي تمركز كند.
در تمام ميكروسكوپ‌ها هدف اين است كه با براي ديدن تصوير، چشم در بي نهايت تـمــركــز كـنــد. ســردردو خـسـتـگــي چـشــم‌هــا كــه مـمكـن اسـت بعـد از استفـاده از يـك مـيـكـروسـكـوپ رخ دهـد مـعـمـولا نـشـانـه اين است كه چشم مجبور شده كه به جاي بي‌نهايت، در يك فاصله‌ي نزديك تمركز كند.
اصل پايه‌ي ميكروسكوپ اين است كه يك عدسي شي اي با فاصله‌ي كانوني بسيار كوتاه (اغلب در حد چند ميلي متر) براي تشكيل يك تصوير واقعي با بزرگنمائي بالا از شي استفاده مي‌شود. امروزه در عمل براي بزرگنمائي از دو عدسي استفاده مي‌شود: شي اي كه تصويري در بي نهايت ايجاد مي‌كند و يك عدسي ضعيف تر كه يك تصوير واقعي در صفحه‌ي كانوني خود تشكيل مي‌دهد. 

منبع: نشریه مهندسی پزشکی شماره ۱۴۶، مهندس فاطمه یاوری